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PERFIL DE AZOADOS BIOQUÍMICA CLÍNICA PRESENTAN: Alarcón Aguilar Teresa Mora Martínez Hugo Pliego Porras Gisela Vásquez García Ma. Maribel Q.F.B. 702 11 Septiembre 2013

Introducción Los azoados son compuestos nitrogenados no proteicos que se encuentran en bajas concentraciones en suero y en altas concentraciones en la orina. En el plasma existen más de 15 compuestos nitrogenados no proteicos (NPN) diferentes con una concentración total de nitrógeno de 250-400 mg/l. Gonzalez B.J.M, Bioquímica Clínica (1998) España, Mcgraw-Hill Interamericana.

 La urea es el principal compuesto nitrogenado no proteico del plasma, el cual representa aproximadamente un 45% del total.  Otros constituyentes principales en orden decreciente de contribución de nitrógeno son los aminoácidos, ácido úrico, creatinina, creatina y amoniaco.  Como consecuencia de una baja función renal se observan mayores concentraciones de varios de los componentes principales, por ejemplo, urea, ácido úrico y creatinina.

Ángel M.G/M.R, Interpretación clínica del laboratorio, (1996), Bogotá (Colombia), Panamericana

 La enfermedad hepática puede provocar una disminución del metabolismo de los aminoácidos con un incremento correspondiente del nitrógeno derivado de los aminoácidos en el plasma.  Cuando se lesiona el túbulo se pierde la capacidad de secreción de la urea y creatinina (secreción tubular), por lo que aumenta en la sangre, por lo tanto en los padecimientos tubulares hay aumento de azoados.  Cuando hay aumento de azoados en la sangre indica que hay daño en el glomérulo o en el túbulo y se produce un síndrome llamado síndrome ureico. Gonzalez B.J.M, Bioquímica Clínica (1998) España, Mcgraw-Hill Interamericana.

 Azoemia es una designación bioquímica que se refiere a cualquier aumento significativo de la concentración plasmática de compuestos nitrogenados no proteicos, principalmente urea y creatinina.  La azoemia muchas veces se clasifica como prerrenal, renal y posrenal.  La azoemia prerrenal es el resultado de una perfusión inadecuada de los riñones y, por tanto, de una menor filtración glomerular en presencia de una función renal normal. Amadeo J.P, Química Clínica Métodos, (1990) Buenos Aires (Argentina), Panamericana.

UREA Es el producto final del metabolismo proteico

1Bernard

H.J, Diagnóstico y Tratamiento Clínicos por el laboratorio, (2000), Barcelona (España), Masson

Sintetizada por el hígado, pasa al torrente sanguíneo, se distribuye a todos los líquidos intra y extracelulares, y se excreta la mayor parte por los riñones Se excreta en cantidades mínimas en la sudoración y es degradada por las bacterias intestinales Todo esto indica que una concentración aumentada de urea no es obligatoriamente signo de disfunción renal (insuficiencia renal), ya que otros muchos factores pueden influirla. Las nefronas renales pueden concentrar urea con un gradiente hasta 50 veces mayor que en plasma 1Bernard

H.J, Diagnóstico y Tratamiento Clínicos por el laboratorio, (2000), Barcelona (España), Masson

PRINCIPIO DEL ANALISIS Y USO ACTUAL

La medición analítica de la urea aún se denomina convencionalmente nitrógeno ureico en sangre (BUN), la determinación de la urea se practica en suero o plasma. 1Bernard

H.J, Diagnóstico y Tratamiento Clínicos por el laboratorio, (2000), Barcelona (España), Masson

Los valores de BUN pueden ser convertidos en concentraciones de urea de la siguiente manera: Peso atómico del nitrógeno = 14 g/mol; peso molecular de la urea = 60.06 g/mol La urea contiene dos átomos de nitrógeno por molécula. El nitrógeno de urea constituye el 46.6 % de su peso (28 dividido por 60.06) En consecuencia: 10 mg/L de BUN dividido por 0.466 = 21.46 mg/L de urea = 0.36 mmol/L de urea ó  mg de urea N/L x 2.146 = mg de urea/L  mg de urea N/L x 0.036 = mmol de urea/L. El margen de referencia para el BUN está alrededor de 6-20 mg/100 dL (2.17.1mmol/l)

1Bernard

H.J, Diagnóstico y Tratamiento Clínicos por el laboratorio, (2000), Barcelona (España), Masson

MMETODOS ETODOS

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H.J, Diagnóstico y Tratamiento Clínicos por el laboratorio, (2000), Barcelona (España), Masson

sangre o suero o muestra de orina o en un filtrado de proteínas.

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H.J, Diagnóstico y Tratamiento Clínicos por el laboratorio, (2000), Barcelona (España), Masson

AMBAS REACCIONES COLORIMÉTRICAS La reacción de Berthelot (método 2) entre el amoniaco y el fenol–NaOCl (HIPOCLORITO DE SODIO) producía un complejo de azul de indofenol con un máximo de absorción en 630 nm. Esta reacción se realizaba a menudo con nitroferricianuro de sodio como catalizador.

El método más común para determinar la concentración de urea en suero u orina es la medición del amoniaco formado en la reacción con la ureasa, que emplea un sistema enzimático acoplado y una reacción NAD/NADH indicadora (método 3). Esas reacciones se miden en a 340 nm. 1Bernard

H.J, Diagnóstico y Tratamiento Clínicos por el laboratorio, (2000), Barcelona (España), Masson

MUESTRA El suero y plasma heparinizado pueden ser empleados en los métodos de diacetilmonoxima, ureasa/GLDH y conductimétrico. Mediante estos tres métodos es posible analizar orina en diluciones 1:20 a 1:50, dependiendo del método y del instrumento empleados. Dada la susceptibilidad de la urea a la degradación bacteriana, las muestras de orina y suero debe conservarse entre 4 a 8º C hasta su análisis. También puede conservarse las muestras de orina a un ph menor de 4.2

1Bernard

H.J, Diagnóstico y Tratamiento Clínicos por el laboratorio, (2000), Barcelona (España), Masson

INTERVALO DE REFERENCIA Los intervalos de referencia para el BUN sérico varían según el método. Estadísticamente se observan valores más elevados en los hombres y en grupos etarios mayores. Para los adultos estas diferencias carecen de importancia clínica. Los niños pequeños tienen valores en suero algo más bajos que los niños mayores y que los adultos. Las variaciones individuales en los valores de BUN también dependen de los hábitos dietéticos del individuo, las personas que consumen menor cantidad de proteínas poseen una menor concentración de urea en suero. 1Bernard

H.J, Diagnóstico y Tratamiento Clínicos por el laboratorio, (2000), Barcelona (España), Masson

Correlación Patológica  La uremia es un síndrome clínico que puede producirse con una intensa azoemia prolongada y comprende acidosis, desequilibrio hidroelectrolítico, nauseas, vómitos y otras manifestaciones incluyendo el coma.  La azoemia posrenal suele ser el resultado de una obstrucción del tracto urinario, de forma que se reabsorbe urea a la circulación.1

1Amadeo

J.P, Química Clínica Métodos, (1990) Buenos Aires (Argentina), Panamericana.

CREATININA La masa de creatina se encuentra fundamentalmente en el musculo por tanto la cantidad en plasma es reflejo de la propia masa muscular.

Se forma en el musculo partir de creatina. Mediante la creatina quinasa se convierte en fosfocreatina.

Alrededor del 2% se convierte diariamente en creatinina. Excretada por los riñones y en minoría por las heces.

3 Gonzalez B.J.M, Bioquímica Clínica (1998) España, Mcgraw-Hill Interamericana.

La determinación de creatinina se principalmente para estimar la función renal.

realiza

En general el nivel en suero o plasma es el más empleado para controlar esta función.

Los valores plasmáticos junto con la velocidad de excreción urinaria pueden ser usados para determinar la velocidad de filtración glomerular (VFG).3

3 Gonzalez B.J.M, Bioquímica Clínica (1998) España, Mcgraw-Hill Interamericana.

Por ello los valores de referencias son distintos entre varones y mujeres. Valores normales de creatinina en plasma Hombres

Mujeres

Mínimo

Máximo

Mínimo

Máximo

0.5 mg/dL

1.5 mg/dL

0.5 mg/dL

1.3 mg/dL

No modifica su nivel en el suero con la dieta, ejercicio, edad y procesos catabólicos. 4Ángel

M.G/Ángel M.R, Interpretación clínica del laboratorio, (1996), Bogotá (Colombia), Panamericana

MÉTODOS ENZIMÁTICOS MUESTRA Es posible analizar suero, plasma u orina diluida esta ultima debe llevarse a una concentración final de creatinina de unos 34 a 68 mg/l. Los métodos enzimáticos requieren la separación rápida de suero y el análisis inmediato para reducir la producción de amoniaco in vitro.2

4Ángel

M.G/Ángel M.R, Interpretación clínica del laboratorio, (1996), Bogotá (Colombia), Panamericana

Uno de los más utilizados se basa en la función de la acción de la creatininasa y creatinasa.

4Ángel

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DEPURACIÓN DE CREATININA Se inicia haciendo evacuar la vejiga al paciente al comienzo de un periodo de 24 hrs. Se recoge la orina durante todo el periodo, se vacía nuevamente la vejiga al final y se extrae una muestra de sangre. Se determina el nivel de creatinina en suero y se mide el volumen recolectado de orina. 4Ángel

M.G/Ángel M.R, Interpretación clínica del laboratorio, (1996), Bogotá (Colombia), Panamericana

Se calcula la depuración de creatinina mediante la siguiente formula:

El intervalo para la depuración de creatinina en personas sanas corregido para una superficie corporal de 1.73 mts2 es de 90-120 ml/min. 4Ángel

M.G/Ángel M.R, Interpretación clínica del laboratorio, (1996), Bogotá (Colombia), Panamericana

Correlación Patológica *Una elevación en los niveles de creatinina de la sangre es observada cuando hay un marcado daño en las nefronas.

*Por lo tanto esta prueba no es conveniente para detectar estados tempranos de enfermedad del riñón. *Una mejor valoración de la función del riñón es dada por la prueba de depuracion de creatinina.

*La separación de creatinina puede ser calculada con precisión usando la concentración de la creatinina del suero y alguna o todas las variables siguientes: sexo, edad, peso, y raza con una recolección de orina de menos de 24 horas. *Algunos laboratorios calcularán el ClCr si está indicado en la forma de solicitud de la patología; y la edad, el sexo, y el peso necesarios son incluidas en la información del paciente.

ÁCIDO ÚRICO *Es el producto del catabolismo de las purinas

Rangos normales En los hombres está comprendido entre 3.4 a 7 mg/dL En las mujeres entre 2.4 a 5 mg/dL Solamente el 15% de pacientes afectados de gota se encuentran con niveles elevados (de 6 a 9.5 mg/dL).

Gonzalez B.J.M, Bioquímica Clínica (1998) España, Mcgraw-Hill Interamericana

PREPARACION DEL PACIENTE Es recomendable que 3 días antes de la determinación, se abstenga de comer carne e ingerir vino tinto. Se aconseja evitar el estrés y estar en reposo.

Gonzalez B.J.M, Bioquímica Clínica (1998) España, Mcgraw-Hill Interamericana

MUESTRA: Puede emplearse suero o plasma, deben evitarse el EDTA y fluoruro. También son útiles las alícuotas de orina de 24 horas

Gonzalez B.J.M, Bioquímica Clínica (1998) España, Mcgraw-Hill Interamericana

MUESTRA SANGUINEA La dosificación se verifica en suero y el paciente debe estar en ayunas de 10 horas en promedio.

Rangos normales urinarios En orina de 24 horas recogida en recipiente con adición de 15 g de acido bórico y guardada en refrigeración, las cifras promedio están comprendidas entre 250 a 750 mg/24 horas. Gonzalez B.J.M, Bioquímica Clínica (1998) España, Mcgraw-Hill Interamericana

DETERMINACIÓN METODOS ENZIMATICOS

+3 Ac. bromofenol

La incubación de ácido úrico con uricasa se lleva a cabo en buffer Tris a pH de 8.5 a 37°C. la cantidad de ácido úrico en la muestra es directamente proporcional a la absorbancia de la coloración. La reacción se mide por la disminución de la absorbancia a 283 nm. Gonzalez B.J.M, Bioquímica Clínica (1998) España, Mcgraw-Hill Interamericana

RELACIÓN ACIDO URICO-CREATININA Esta determinación se realiza en la primera orina de la mañana y se empela como prueba discriminatoria para la detección del síndrome de Lesch-Nyhan. La relación también ha sido aplicada a muestras de orina de 24hrs. de pacientes adultos con gota para detectar la deficiencia parcial de dicha enzima. Los valores normales de la relación acido úrico – creatinina  En pacientes sanos oscilan entre 0.21 y 0.59  En pacientes con gota van de o.15 a 0.73 Gonzalez B.J.M, Bioquímica Clínica (1998) España, Mcgraw-Hill Interamericana

Correlación Patológica  Algunas enfermedades, alteraciones fisiológicas, cambios bioquímicos se asocian a modificaciones de la concentración del acido úrico en el plasma. El aumento de la concentración del acido úrico es más frecuente y clínicamente más significativo.  Entre las etiologías más comunes de la hiperuricemia se trata de un fallo renal, tiene una relación positiva con la hiperlipidemia, obesidad, hipertensión.  La gota es un trastorno del metabolismo de las purinas o de la excreción renal del acido úrico.

 Solamente el 15% de los pacientes afectados de gota se encuentran niveles elevados. La mayoría de los gotosos están entre los niveles de 6mg/dL a 9.5 mg/dL.1  Los varones constituyen más del 90% de todos los casos, mientras que la gota no es común en las mujeres antes de la menopausia. La edad más probable de aparición es en la quinta década y la enfermedad es muy infrecuente antes de los 20 años.1 1Bernard

H.J, Diagnóstico y Tratamiento Clínicos por el laboratorio, (2000), Barcelona (España), Masson

Artículo en Ingles  Automated and manual direct methods for the determination of blood urea WH Marsh, B Fingerhut, H Miller - Clinical chemistry, 1965 - Am Assoc Clin Chem

“Métodos directos automáticos y manuales para la determinación de urea en sangre”.