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UNIVERSIDAD NACIONAL DE JAÉN MANUAL DE BIOSEGURIDAD DE BIOLOGÍA LABORATORIO DE BIOLOGÍA

MANUAL DE BIOSEGURIDAD DE

LABORATORIO DE BIOLOGÍA UNIVERSIDAD NACIONAL DE JAÉN 2017

UNIVERSIDAD NACIONAL DE JAÉN MANUAL DE BIOSEGURIDAD DE BIOLOGÍA LABORATORIO DE BIOLOGÍA

ÍNDICE

UNIVERSIDAD NACIONAL DE JAÉN MANUAL DE BIOSEGURIDAD DE BIOLOGÍA LABORATORIO DE BIOLOGÍA

1. INTRODUCCIÓN

El presente Manual de laboratorio de biología de la carrera profesional de Tecnología Médica ha sido diseñado para facilitar el aprendizaje a los estudiantes que se inician en el campo del estudio del fascinante mundo de las ciencias biológicas.

El Manual ha sido preparado teniendo en cuenta el perfil de un investigador, utilizando el método científico como su eje fundamental, para facilitar el aprendizaje de los conceptos más generales de las ciencias biológicas que complementan la programación teórica en Biología que recibe el estudiante. Con este manual se pretende establecer un contacto directo con los fenómenos biológicos y las actividades de investigación científica, de tal manera que podamos preparar profesionales calificados y con una formación integral en el conocimiento biológico. En el Manual se incluyen aspectos básicos para la realización de los trabajos prácticos como el uso adecuado de un instrumental básico, el microscopio, la balanza analítica, el pH metro, el espectrofotómetro, entre otros; los fundamentos básicos de las técnicas utilizadas en los procesos biológicos así como actividades de desarrollo científico, normas de bioseguridad y actividades de campo.

La Bioseguridad hace parte de la Biología que estudia el uso seguro de los recursos biológicos y genéticos. También está compuesta por un conjunto de normas y medidas preventivas que nos ayudan a sostener y mantener el control de los riesgos que se puedan presentar en el laboratorio, que afecten la salud y atenten con la vida misma del estudiante. Por esto se hace necesario acatar las normas de seguridad para evitar cualquier accidente y prevenir afecciones en la salud de los estudiantes.

Por precaución, todo individuo que ingrese al laboratorio debe aportar los elementos requeridos de Bioseguridad y así generar un hábito de cultura y crear un ambiente seguro dentro del laboratorio y evitar riesgos que pongan en peligro su vida. El personal de laboratorio debe cumplir con las normas de bioseguridad y los directivos de la institución deben cumplir con brindar las facilidades para que estas normas sean aplicadas.

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a) OBJETIVO GENERAL: 

Conocer la importancia de acatar y cumplir las normas de bioseguridad que se deben tener en cuenta al momento de realizar las prácticas en el laboratorio de biología, esto con el fin de prevenir y controlar los accidentes y evitar daños físicos o integrales que se presenten con elementos químicos, orgánicos e inorgánicos.

b) OBJETIVOS ESPECÍFICOS: 

Introducir al estudiante universitario en la observación directa de los fenómenos biológicos, a través del método científico y consolidar los conocimientos de la teoría de un curso introductorio de Biología General, de tal manera que sea capaz de aplicar conceptos y relacionarlos, además de facilitar la integración del conocimiento y despertar el interés del estudiante en esta ciencia.



Mantener una Adecuada manipulación residuos biológicos infecciosos

a través de

clasificación de agentes biológicos por grupos de riesgo. 

Proporcionar medidas para la disminución de riesgos al que se encuentra expuesto el personal responsable de laboratorio, docentes y alumnos.

2. FINALIDAD: Tienen como finalidad evitar que como resultado de la actividad asistencial se produzcan accidentes. Se trata de medidas que operativamente tienden a proteger tanto al estudiante como al docente o responsable de laboratorio y su utilización tiene carácter obligatorio. Las normas de bioseguridad disminuyen pero no eliminan el riesgo.

3. BASE LEGAL: 

Ley de bioseguridad N° 27104 (1999) y su reglamento (2003).



Reglamento de bioseguridad (D.S 108-2002-PCM)



Constitución política del Perú, Art. 2° inciso 22.



Ley general de salud, ley N° 26842, titulo primero indica los derechos y deberes concernientes a la labora individual, título II capitulo quinto, sexto y octavo, donde señala las medidas de bioseguridad.



NTP 399.011 Indecopi. Símbolos medidas y disposición de señales de bioseguridad.

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4. PRINCIPIOS GENERALES DE BIOSEGURIDAD 4.1 Universalidad. Las medidas de bioseguridad deben involucrar a todas las dependencias de la institución. Todo el personal, pacientes (si los hubiera) y visitantes deben cumplir de rutina con las normas establecidas para prevenir accidentes.

4.2 Uso de barreras. Establece el concepto de evitar la exposición directa a todo tipo de muestras potencialmente contaminantes, mediante la utilización de materiales o barreras adecuadas que se interpongan al contacto con las mismas, minimizando los accidentes. 4.3 Medios de eliminación Del material contaminado. Es el conjunto de dispositivos y procedimientos a través de los cuales se procesan y eliminan muestras biológicas sin riesgo para los operadores y la comunidad. 4.4 Evaluación de riesgos. Es el proceso de análisis de la probabilidad de que ocurran daños, heridas o infecciones en un laboratorio. Debe ser efectuada por el personal de laboratorio más familiarizado con el procesamiento de los agentes de riesgo, el uso del equipamiento e insumos, los modelos animales usados y la contención correspondiente.

5. RESPONSABILIDADES 5.1 DOCENTE:  Conocer el manual de seguridad para laboratorios.  Es el responsable de velar por el cumplimiento por parte de los alumnos de las medidas de seguridad al interior del laboratorio, cada vez que dicte alguna clases o realice alguna práctica de laboratorio.  Dar las indicaciones básicas a los alumnos sobre los riesgos a los cuales están expuestos y cuales son las medidas de seguridad para evitar la ocurrencia de accidentes.  Exigir a los alumnos el uso de los elementos de protección personal requeridos para las prácticas de laboratorio.  Crear los procedimientos de trabajo para los procesos que implican riesgo alto de accidente.

UNIVERSIDAD NACIONAL DE JAÉN MANUAL DE BIOSEGURIDAD DE BIOLOGÍA LABORATORIO DE BIOLOGÍA 5.2 JEFE DE PRACTICA/ENCARGADO DE LABORATORIO  Conocer el manual de bioseguridad para laboratorios.  Dar cumplimiento a las medidas de seguridad (para riesgos Químicos, Riesgos Físicos, Riesgos Biológicos) en su respectiva área.  Capacitar a los funcionarios a su cargo en las medidas de seguridad que debe cumplir el laboratorio.  Realizar un control periódico respecto al cumplimiento de las medidas de seguridad e implementar las acciones correctivas en caso de existir riesgo de accidentes.  Informar al Docente sobre los requerimientos de seguridad que se deben seguir en caso de equipos, máquinas que generan riesgo para la salud del usuario.  Mantener en buenas condiciones el material didáctico para las prácticas.  Mantener en buenas condiciones de seguridad toda la implementación necesaria para contener una emergencia.; extintores; botiquín de primeros auxilios; aire acondicionado y otros).  En caso de ocurrir algún accidente, será responsable de avisar en forma inmediata al Docente.  En caso de ocurrir un incendio será responsable de dirigir a los alumnos o usuarios por las salidas de emergencia a los puntos de reunión previamente establecidos.  El jefe o encargado de laboratorio puede delegar algunas de estas funciones en quien estime conveniente. 5.3 USUARIOS (Alumnos, profesionales, técnicos y administrativos).

Los usuarios serán responsables de cumplir con el Manual de bioseguridad para el laboratorio de Biologia, con el objetivo de realizar un trabajo seguro, previniendo la exposición innecesaria a riesgos químicos, físicos o biológicos.

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6. TIPOS DE RIESGOS En este Manual se han considerado los riesgos asociados al contacto y la manipulación de agentes químicos (riesgo químico), Físicos (riesgo Físico) y biológicos (riesgo biológico). 6.1 RIESGOS FÍSICOS

Se refiere a todos aquellos factores ambientales que dependen de las propiedades físicas de los cuerpos, tales como carga física, ruido, iluminación, radiación ionizante, radiación no ionizante, temperatura elevada exposición a ruidos y vibraciones o una carga calórica sobre la superficie corporal y quemaduras especialmente aquellas que están sin protección , que actúan sobre los tejidos y órganos del cuerpo del trabajador y que pueden producir efectos nocivos, de acuerdo con la intensidad y tiempo de exposición de los mismos. 6.2 RIESGOS QUÍMICOS Se refiere a la manipulación inadecuada de agentes químicos se está expuesto a: ingestión, inhalación y/o contacto con la piel, tejidos, mucosas u ojos, de sustancias tóxicas, irritantes, corrosivas y/o nocivas. Algunos agentes químicos son fundamentalmente volátiles, por lo tanto, aumentan el riesgo de exposición a ellos. La identificación del riesgo químico es el punto de partida de la correcta gestión de la seguridad y la salud en el laboratorio. Cualquier manipulación de un producto químico presenta siempre una serie de peligros para la salud o el medio ambiente relacionados con sus propiedades. Cuando la sustancia química es peligrosa para la salud humana hablamos de riesgo tóxico. Estos efectos pueden ser transitorios o permanentes y manifestarse de forma aguda, a medio plazo o crónica. La toxicidad de una sustancia depende de varios factores, como su composición química, estado físico y dosis, así como del estado fisiológico y de la susceptibilidad individual. Los agentes implicados con mayor frecuencia en los accidentes químicos en un laboratorio de Microbiología son los ácidos y bases, seguidos de los productos inflamables (alcoholes y cetonas) y de los colorantes.

UNIVERSIDAD NACIONAL DE JAÉN MANUAL DE BIOSEGURIDAD DE BIOLOGÍA LABORATORIO DE BIOLOGÍA 6.3 RIESGOS BIOLÓGICOS.

6.3.1

Principios básicos y definiciones

Los agentes biológicos constituyen un factor de riesgo laboral por su capacidad de desencadenar enfermedades. La bioseguridad es un proceso que incluye los principios, técnicas y prácticas de contención que se realizan con el fin de evitar la exposición involuntaria al material biológico o su liberación accidental, por tanto para reducir o eliminar el riesgo biológico. Sus objetivos son la prevención de las infecciones contraídas en el laboratorio y evitar el escape accidental de agentes biológicos peligrosos que puedan causar graves efectos negativos sobre los seres humanos, animales y plantas. La bioseguridad afecta a todas las actividades del laboratorio, incluso las anteriores a la recepción del agente biológico (obtención y transporte de muestras), continuando con la formación y capacitación del personal, el empleo de prácticas y técnicas microbiológicas correctas, el uso adecuado de los reactivos, materiales y equipos, el transporte y almacenamiento seguro de los agentes y, en última instancia, la esterilización final y su destrucción. Con el fin de proteger la salud de los trabajadores frente a los riesgos que se derivan de la exposición a los agentes biológicos durante el desarrollo de sus actividades, se publicó el RD 664/1997, de 12 de mayo, que incluye las siguientes definiciones: 6.3.1.1.1

Agentes biológicos: microorganismos, con inclusión de los genéticamente modificados, cultivos celulares y endoparásitos humanos, susceptibles de originar cualquier tipo de infección, alergia o toxicidad.

6.3.1.1.2

Microorganismos: Toda entidad microbiológica, celular o no, capaz de reproducirse o de transferir material genético. Se consideran cuatro tipos básicos: bacterias, hongos, virus y parásitos (protozoos, helmintos, etc.).

6.3.1.1.3

Cultivo celular: el resultado del crecimiento in vitro de células obtenidas de organismos multicelulares.

6.3.1.1.4

Peligro: todo aquello que puede producir un daño o un deterioro de la calidad de vida individual o colectiva de las personas.

6.3.1.1.5

Daño: la consecuencia producida por un peligro sobre la calidad de vida individual o colectiva de las personas.

6.3.1.1.6

Riesgo: la probabilidad de que, ante un determinado peligro, se produzca un

UNIVERSIDAD NACIONAL DE JAÉN MANUAL DE BIOSEGURIDAD DE BIOLOGÍA LABORATORIO DE BIOLOGÍA cierto daño, pudiendo por ello cuantificarse. La Organización Mundial de la Salud (OMS) incluye, además, las siguientes definiciones: 6.3.1.1.7

Contaminación: presencia de un agente infeccioso en la superficie del organismo; también en vestimenta, ropa de cama, instrumentos quirúrgicos, apósitos y otros objetos inanimados, incluyendo el agua y los alimentos.

6.3.1.1.8

Limpieza : eliminación, mediante lavado con agua caliente, jabón o un detergente, o por el empleo de una aspiradora, de los agentes infecciosos y sustancias orgánicas de superficies en las cuales éstos pueden encontrar condiciones adecuadas para sobrevivir o multiplicarse.

6.3.1.1.9

Desinfección: eliminación de agentes infecciosos que están fuera del organismo por medio de la exposición directa a agentes químicos o físicos.

6.3.1.1.10 Esterilización: destrucción de todas las formas de vida por calor, radiación, gas o tratamiento químico. 6.4 EVALUACIÓN DE RIESGOS

Las operaciones habituales en el laboratorio de biología que pueden generar riesgo químico son: 6.4.1

Trasvases por vertido libre. Si el producto es irritante o corrosivo, se utilizaran gafas. El trasvase de ácidos o bases se debe de hacer utilizando guantes de cloruro de polivinilo (PVC).

6.4.2

Extracción con disolventes volátiles. Usualmente, son extracciones Líquido - líquido y a temperatura ambiente. Se suelen utilizar disolventes volátiles inflamables, por lo que los riesgos a controlar son los derivados de la sobrepresión y presencia de vapores inflamables. Para evitar el problema del contacto directo es recomendable utilizar guantes impermeables y ropa de protección y la manipulación se debe de hacer en una campana de gases. Los volúmenes de disolventes y las operaciones de este tipo que se llevan a cabo comúnmente en un laboratorio de Microbiología Clínica son cada vez más escasos.

6.4.3

Limpieza del material de vidrio. Aparte de los riesgos físicos inherentes a este tipo de material (rotura y cortes), durante el proceso de Limpieza pueden producirse riesgos químicos, como

UNIVERSIDAD NACIONAL DE JAÉN MANUAL DE BIOSEGURIDAD DE BIOLOGÍA LABORATORIO DE BIOLOGÍA intoxicación, dermatitis, quemaduras cutáneas u oculares, etc., atribuibles a los residuos contenidos en dicho material. El mayor riesgo deriva del desconocimiento de la existencia de estos productos (tipo y composición) en cada circunstancia concreta. La prevención se basará en la formación/información del personal y en la ventilación del lugar de limpieza, así como el vaciado o desecho previos de los recipientes antes de su limpieza, en función de los componentes presentes. 6.4.4

Transporte. El riesgo deriva fundamentalmente de la rotura o derramamiento accidental durante su transporte. Según el volumen y cantidad de contenedores es aconsejable el uso de carritos especiales que eviten choque y roturas.

6.4.5

Almacenamiento. Para el almacenamiento de agentes químicos, además de las características intrínsecas de peligrosidad (explosividad, inflamabilidad, toxicidad, corrosividad, etc.) debe de considerarse otros aspectos generales como:  Minimizar el stock almacenado.  Utilizar estanterías fijadas a la pared.  Utilizar armarios de seguridad.  Observar las normas de incompatibilidad de sustancias químicas.

6.4.6

Otras operaciones. Generan riesgo son las que utilizan el vacío (evaporación, destilación, filtración y secado), reacciones químicas, destilación, evaporación y desecación.

7. CLASIFICACIÓN DE PATÓGENOS POR GRUPOS DE RIESGO El RD 664/97 clasifica los agentes biológicos en cuatro grupos en función del riesgo de infección siguiendo las recomendaciones de la OMS que propugna la elaboración de una clasificación nacional o regional de los microorganismos en distintas categorías o grupos de riesgo. 7.1 Agente biológico del grupo 1: el que es poco probable que cause una enfermedad en el

UNIVERSIDAD NACIONAL DE JAÉN MANUAL DE BIOSEGURIDAD DE BIOLOGÍA LABORATORIO DE BIOLOGÍA hombre. 7.2 Agente biológico del grupo 2 Aquél que puede causar una enfermedad en el hombre y suponer un peligro para los trabajadores, siendo poco probable que se propague a la colectividad, y para el que existe generalmente profilaxis o tratamiento eficaz. 7.3 Agente biológico del grupo 3. Aquél que puede causar una enfermedad grave en el hombre y presenta un serio peligro para los trabajadores, con riesgo de que se propague a la colectividad, existiendo frente a él, generalmente, profilaxis o tratamiento eficaz. 7.4 Agente biológico del grupo 4. Aquél que, causando una enfermedad grave en el hombre, supone un serio peligro para los trabajadores, con muchas probabilidades de que se propague a la colectividad y sin que exista frente a él, generalmente, profilaxis o tratamiento eficaz.

Estos niveles de riesgo condicionan las medidas preventivas tanto individuales como colectivas, la manipulación del material biológico, la ubicación del laboratorio, las instalaciones, las medidas de protección, las técnicas de laboratorio, etc. Según esta clasificación, el anexo II del RD 664/97 presenta una lista de agentes biológicos de los grupos 2, 3 y 4, ordenados por bacterias, hongos, virus y parásitos.

Cuando se trate de un agente biológico que no haya sido objeto de una evaluación concluyente para clasificarlo, pero se sospecha que su manipulación puede comportar un riesgo para la salud, las actividades deben desarrollarse en un lugar de trabajo cuyo confinamiento físico corresponda como mínimo al nivel de contención biológica 3 (NCB-3).

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8. NIVELES DE BIOSEGURIDAD QUE PUEDEN SER ENCONTRADOS EN EL ÁREA DE TRABAJO. El término contención se emplea para describir los métodos, instalaciones y equipos que hacen seguro el manejo de materiales infecciosos en el ámbito del laboratorio donde son manipulados o conservados. El propósito de la contención es reducir al mínimo la exposición a agentes potencialmente peligrosos del personal de laboratorio, de otras personas o del entorno.

Los tres elementos fundamentales de la contención son:

a) Las prácticas y técnicas del laboratorio. b) Los equipos de seguridad (barreras primarias). c) El diseño y construcción de las instalaciones (barreras secundarias).

El grado de biopeligrosidad de un determinado microorganismo, según se establece en las normas legales aludidas, determina inicialmente el nivel de contención a implantar. Sin embargo, es importante señalar que no es el único elemento a considerar. Se recomienda que, además, se tengan en cuenta otros factores como las condiciones de virulencia particulares del agente en cuestión, su dosis infectiva, la concentración de éste, el volumen del material concentrado que va a manipularse, la vía natural de infección, la actividad prevista en el laboratorio (producción de aerosoles, centrifugación), la manipulación genética que pueda ampliar su gama de huéspedes o su sensibilidad a los agentes terapéuticos, entre otros. 8.1 NIVEL 1: es el nivel de seguridad requerido para los agentes biológicos del nivel de bioseguridad 1, es decir, los que no producen enfermedad en el ser humano sano y de sensibilidad conocida y estable a los antimicrobianos. Es el utilizado en los laboratorios de prácticas de universidades o centros docentes donde se emplean cepas no patógenas (por ejemplo, Escherichia coli K12) o el de los microorganismos empleados en las industrias de alimentación (Lactobacillus, etc.). 8.2 NIVEL 2: Este nivel involucra a agentes de moderado peligro potencial para el personal y el medio

UNIVERSIDAD NACIONAL DE JAÉN MANUAL DE BIOSEGURIDAD DE BIOLOGÍA LABORATORIO DE BIOLOGÍA ambiente. Es adecuado cuando se trabaja con sangre derivada de humanos, fluidos corporales, tejidos, etc. Donde puede desconocerse la presencia de un agente infeccioso. La mayoría de trabajos con sangre requiere de este nivel de bioseguridad. Los riesgos primarios del personal que trabaja con estos agentes están relacionados con exposiciones accidentales de membranas mucosas o percutáneas, o ingestión de materiales infecciosos.

Debe tenerse especial precaución con agujas o instrumentos cortantes contaminados. Si bien no se ha demostrado que los organismos que se manipulan de rutina en el Nivel de Bioseguridad 2 sean transmisibles a través de la vía de aerosoles, los procedimientos con potencial de producir aerosoles o grandes salpicaduras -que pueden incrementar el riesgo de exposición de dicho personal deben llevarse a cabo en equipos de contención primaria o en dispositivos tales como un BSC o cubetas centrífugas de seguridad.

Se deben utilizar las demás barreras primarias que correspondan, tales como máscaras contra salpicaduras, protección facial, delantales y guantes. Se debe contar con barreras secundarias,

tales

como

piletas

para

lavado

de

manos

e

instalaciones

de

descontaminación de desechos a fin de reducir la contaminación potencial del medio ambiente.

8.3 NIVEL 3: Trabajo que involucra a agentes que pueden causar enfermedades serias o letales como resultado de la exposición. Trabajo con agentes exóticos o indígenos con potencial de transmisión respiratoria, y que pueden provocar una infección grave y potencialmente letal. Se pone mayor énfasis en las barreras primarias y secundarias. Al manipular agentes del Nivel de Bioseguridad 3 se pone mayor énfasis en las barreras primarias y secundarias para proteger al personal en áreas contiguas, a la comunidad y al medio ambiente de la exposición a aerosoles potencialmente infecciosos.

8.4 NIVEL 4: Es el nivel requerido cuando se procesa con certeza o se sospecha un agente especialmente patógeno, exótico o no, que produce alta mortalidad y para el que no existe tratamiento o éste es poco fiable.

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Trabajo con agentes peligrosos o tóxicos que representan un alto riesgo individual de enfermedades que ponen en peligro la vida, que pueden transmitirse a través de aerosoles y para las cuales no existen vacunas o terapias disponibles. Los riesgos principales para el personal que trabaja con agentes del Nivel de Bioseguridad 4 son la exposición respiratoria a aerosoles infecciosos, la exposición de membranas mucosas o piel lastimada a gotitas infecciosas y la auto inoculación.

Todas las manipulaciones de materiales de diagnóstico potencialmente infecciosos, cepas puras y animales infectados en forma natural o experimental, implican un alto riesgo de exposición e infección para el personal de laboratorio, la comunidad y el medio ambiente. 9. NORMAS DE EMERGENCIA

9.1 Vias de evacuacion:

El personal debe conocer las vías de escape seguras en caso de una emergencia que requiera del abandono obligatorio del recinto (ejemplo: en caso de incendio, terremoto, derrames de agentes infecciosos.

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PLANO DEL LABORATORIO DE BIOLOGIA

UNIVERSIDAD NACIONAL DE JAÉN MANUAL DE BIOSEGURIDAD DE BIOLOGÍA LABORATORIO DE BIOLOGÍA 10. TIPOS DE EMERGENCIA: Puede presentarse diversos tipos de emergencia en el laboratorio, estos son: Biológicos Químicos Incendios Desastres Para poder enfrentar estos tipos de emergencia todo Laboratorio debe contar con los siguientes elementos:

a. Extintores de Incendio Bien localizados y de fácil acceso, con cuyo uso los trabajadores estén familiarizados. b. Botiquín El cual debe estar implementado con lo siguiente: Algodón y gasa estéril. Desinfectante (povidona yodada, agua oxigenada). Tela adhesiva Parche curita. Todo esto debe estar rotulado y en óptimas condiciones. Para los desastres naturales como son los terremotos, los planes de emergencias están en relación con organización comunitaria de emergencia. c. Incendios Deben existir planes para este tipo de emergencias: Todos los usuarios deben conocer la localización y uso de los extinguidores. Cuando el incendio es extenso, debe ejercitarse para no intentar apagarlo y limitarse a evacuar al área y cerrar las puertas. Deben realizarse simulaciones avisadas y sin aviso previo de incendio. d. Explosiones Debe evacuarse el lugar de inmediato en caso de explosión.

UNIVERSIDAD NACIONAL DE JAÉN MANUAL DE BIOSEGURIDAD DE BIOLOGÍA LABORATORIO DE BIOLOGÍA 11. ACCIDENTES BIOLÓGICOS Instrucciones generales en caso de accidentes biológicos:

11.1



Primera prioridad es la seguridad de la vida



Avisar inmediatamente al resto de los compañeros



Abandonar todo el recinto



Cerrar la puerta



Deberá estar determinado quien actuará en limpieza de emergencia. TIPOS DE ACCIDENTES BIOLÓGICOS:

a. Derrame de un Tubo Delimitar área contaminada. Colocar desinfectante apropiado al microorganismo que se está trabajando. Cubrir con papel absorbente para sedimentar aerosoles. Dejar actuar al menos 30 minutos antes de retirar material contaminado. Colocar material contaminado en recipientes metálicos con tapa para su traslado a la autoclave. Usar guantes u otros elementos de protección durante los procesos de limpieza y desinfección.

b. Autoinoculaciones Lavar las manos y zona lesionada con abundante agua y jabón, utilice una escobilla limpia se la posee. Aplicar desinfectantes (povidona yodada o agua oxigenada). Quitarse la ropa de trabajo. Informar causa de la herida y agente involucrado. (Accidente Laboral) Acudir rápidamente a la asistencia pública para recibir atención médica. c. Cortes Lavar las manos y zona lesionada. Aplicar desinfectante. Quitarse la ropa de trabajo. Informar causa de la herida y agente involucrado. Acudir a atención médica. Dirigirse a la asistencia pública para recibir atención médica de emergencia.

UNIVERSIDAD NACIONAL DE JAÉN MANUAL DE BIOSEGURIDAD DE BIOLOGÍA LABORATORIO DE BIOLOGÍA 12. MEDIDAS GENERALES EN UNA EMERGENCIA  Los accidentes deben ser registrados en un libro de accidentes del laboratorio.  Todo el personal que trabaja en un Laboratorio debe estar familiarizado

con los

procedimientos de emergencia, de forma que actúe correctamente en caso necesario.  En ningún caso en estas situaciones debe caerse en la improvisación. 12.1

PRIMEROS AUXILIOS EN LABORATORIO

Frente a cualquier

accidente que suceda en el laboratorio, deben considerarse las siguientes

medidas generales:  No perder la calma, evitando actuar precipitadamente.  Realizar un examen físico preliminar para priorizar y atender las lesiones que ponen en peligro la vida del accidentado.  Tranquilizar a la persona accidentada y no dejarla sola.  Mantener acostado y abrigado al accidentado.  No dar líquidos a beber en caso de estar inconsciente.  No mover innecesariamente al accidentado.  Evitar las aglomeraciones.  Gestionar su traslado, en caso necesario, a una sede hospitalaria. 12.2

BARRERAS PRIMARIAS

Son la primera línea de defensa cuando se manipulan materiales biológicos que puedan contener agentes patógenos. El concepto de barrera primaria podría asimilarse a la imagen de una "burbuja" protectora que resulta del encerramiento del material considerado como foco de contaminación. Cuando no es posible el aislamiento del foco de contaminación, la actuación va encaminada a la protección del trabajador mediante el empleo de prendas de protección personal. a. Proteccion personal. Se define el equipo de protección individual como cualquier equipo destinado a ser llevado o sujetado por el trabajador para que le proteja de uno o varios riesgos que puedan amenazar su seguridad o su salud, así como cualquier complemento o accesorio destinado a tal fin.

UNIVERSIDAD NACIONAL DE JAÉN MANUAL DE BIOSEGURIDAD DE BIOLOGÍA LABORATORIO DE BIOLOGÍA b. Protección Corporal. La utilización de mandiles o batas es una exigencia multifactorial en la atención a pacientes por parte de los integrantes del equipo de salud.

Recomendaciones: Usar bata, chaqueta o uniforme dentro del laboratorio. Esta ropa protectora deberá ser quitada inmediatamente antes de abandonar el área de trabajo. Deberá ser transportada de manera segura al lugar adecuado en las “áreas limpias” de la institución.

c. Protección Ocular y Tapaboca: La protección ocular y el uso de tapabocas tienen como objetivo proteger membranas mucosas de ojos, nariz y boca durante procedimientos y cuidados de pacientes con actividades que puedan generar aerosoles, y salpicaduras de sangre. d. Anteojos o lentes de Seguridad: Deben permitir una correcta visión. Deben tener protección lateral y frontal, ventilación indirecta, visor de policarbonato, sistema antirrayaduras y antiempañantes. Deben permitir el uso simultáneo de anteojos correctores. Deben ser de uso personal. Serán utilizados todo el tiempo que dure el procesamiento de las muestras y el fraccionamiento de las unidades de sangre. Cualquier excepción a esta regla, debe estar incluida en el programa de bioseguridad del servicio. 12.3

USO DE ANTEOJOS DE SEGURIDAD CON LENTES CORRECTORES Y DE

CONTACTO

a. Lentes Correctores: Las personas cuya visión requiere el uso de lentes correctoras deben utilizar uno de los siguientes tipos: 

Gafas de seguridad con lentes protectoras graduadas.



Gafas de protección ocular que se pueden llevar sobre las gafas graduadas sin que

UNIVERSIDAD NACIONAL DE JAÉN MANUAL DE BIOSEGURIDAD DE BIOLOGÍA LABORATORIO DE BIOLOGÍA perturben el ajuste de las mismas.

b. Lentes de Contacto:

Las personas que necesiten llevar lentes de contacto durante los trabajos de laboratorio deben ser conscientes de los siguientes peligros potenciales: 

Será prácticamente imposible retirar las lentes de contacto de los ojos después de que se haya derramado una sustancia química en el área ocular.



Los lentes de contacto interferirán con los procedimientos de lavado de emergencia teniendo en cuenta que pueden atrapar y recoger humos y materiales sólidos en el ojo.



Si se produce la entrada de sustancias químicas en el ojo y la persona se queda inconsciente, el personal de auxilio no se dará cuenta de que lleva lentes de contacto.



La utilización de lentes de contacto en el laboratorio debería considerarse con detalle, dando una mayor importancia a la elección de la protección ocular para que se ajuste perfectamente a los ojos y alrededor de la cara.

c. Tapaboca: Debe ser de material impermeable frente a aerosoles o salpicaduras. Debe ser amplio cubriendo nariz y toda la mucosa bucal. Puede ser utilizado por el trabajador durante el tiempo en que se mantenga limpio y no deformado. Esto dependerá del tiempo de uso y cuidados que reciba.

d. Proteccion de los pies

Está diseñada para prevenir heridas producidas por sustancias corrosivas, objetos pesados, descargas eléctricas, así como para evitar deslizamientos en suelos mojados. Si cayera al suelo una sustancia corrosiva o un objeto pesado, la parte más vulnerable del cuerpo serían los pies.

No se debe llevar ninguno de los siguientes tipos de zapatos en el laboratorio: 

Sandalias.



Zuecos.



Tacones altos.

UNIVERSIDAD NACIONAL DE JAÉN MANUAL DE BIOSEGURIDAD DE BIOLOGÍA LABORATORIO DE BIOLOGÍA 

Zapatos que dejen el pie al descubierto.

Se debe elegir un zapato de piel resistente que cubra todo el pie. Este tipo de calzado proporcionará la mejor protección. 13. ELEMENTOS DE CONTENCIÓN

Al hablar de Bioseguridad es necesario definir el término contención, que se utiliza para describir métodos seguros para el manejo de agentes infecciosos en el Laboratorio.

13.1

CONTENCION PRIMARIA (EQUIPOS DE SEGURIDAD PERSONAL)

Es la protección del personal y del ambiente inmediato del Laboratorio. Corresponde al uso de buenas prácticas de Laboratorio y al empleo de equipos de desde

elementos

simples

seguridad que incluyen,

de protección como guantes, mascarillas, lentes de seguridad,

delantal y/o pechera plástica, etc., hasta elementos de alta tecnología, como los gabinetes de bioseguridad a) Uniforme y Delantal de Procedimiento. En todo momento es obligatorio que el personal use su uniforme completo y su delantal (guardapolvo) de procedimiento. Se deben usar pecheras plásticas durante el proceso de las muestras, lavado de material y aseo del Laboratorio.

b) Guantes de Procedimientos. Se deben utilizar ante la manipulación de cualquier muestra clínica o donde exista exposición a sangre, suero o fluidos corporales. Es recomendable el uso de guantes de látex por ser de mejor calidad que los de vinilo, excepto cuando el usuario presenta una conocida alergia al látex.

c) Lentes de seguridad.

Se deben utilizar en los procedimientos en los que exista riesgo de salpicaduras. Tener presente que el uso de lentes ópticos no

UNIVERSIDAD NACIONAL DE JAÉN MANUAL DE BIOSEGURIDAD DE BIOLOGÍA LABORATORIO DE BIOLOGÍA reemplazará el uso de los lentes de seguridad.

d) Mascarilla Quirúrgica: Este tipo de mascarilla sólo previene la contaminación de la mucosa bucal y no la inhalación de microorganismos que se transmiten por

vía

aérea. Es recomendable

su uso (en

conjunto con los lentes de seguridad) para la manipulación de cualquier muestra clínica cuando no se dispone de gabinete de bioseguridad.

e) Respirador Particulado: Se recomienda su uso cuando se trabaja con microorganismos que se transmiten por vía inhalatoria, como es el caso del Mycobacterium tuberculosis o los virus de Influenza. f) Gorro: El trabajo de rutina no amerita el uso de gorro con excepción de cuando se procesan las muestras para baciloscopías, situación en la cual el uso del gorro es obligatorio. Durante el procesamiento de muestras el personal debe usar el pelo amarrado.

g) lavado de manos Las manos y las superficies de la piel se deben lavar lo más pronto posible si se contaminan con sangre y/o fluidos corporales. El uso de guantes no excluye ni reemplaza el lavado de manos. Las manos se deben lavar: siempre que exista contaminación visible con

sangre

o

líquidos biológicos, después de completar el

trabajo y antes de abandonar el laboratorio y después de sacarse los guantes.

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UNIVERSIDAD NACIONAL DE JAÉN MANUAL DE BIOSEGURIDAD DE BIOLOGÍA LABORATORIO DE BIOLOGÍA 13.2

CONTENCION SECUNDARIA

Se refiere a la protección del medio ambiente externo del Laboratorio (personal que trabaja en otras áreas y la comunidad) de agentes infecciosos que pudieran salir accidentalmente. Está dada por una combinación del diseño del Laboratorio, prácticas y técnicas microbiológicas, las cuales tienen la mayor importancia en materia de Bioseguridad a) Diseño de laboratorio. En una infraestructura adecuada es importante que: 

Permita una fácil limpieza, con pisos lisos e impermeables con un pequeño declive para asear desde sectores limpios hacia sectores sucios. Paredes lisas e impermeables.



Cubierta de las mesas impermeables al agua, resistentes a ácidos, álcalis y solventes.



Toda sección debe tener un lavamanos o dispensador de alcohol gel.



Ventanas que permitan una adecuada iluminación natural para facilitar la observación y el trabajo general.



Puertas que giren en un solo sentido para evitar accidentes de personas que transportan material. Deben tener en su parte superior un vidrio que permita visualizar si se aproxima otra persona desde el otro lado para evitar choques y accidentes.

b) Procedimientos y técnicas de laboratorio 

Personal con conciencia de los riesgos biológicos involucrados ante el manejo de agentes infecciosos.



Los usuarios deben tener conocimiento de los mecanismos por los cuales se puede producir una infección en el Laboratorio.



Respetar la utilización estricta de los procedimientos y técnicas apropiadas en las distintas áreas de trabajo, disminuyendo con ello el riesgo.



La importancia relativa de cada uno de los elemento fundamentales de bioseguridad es la siguiente:

UNIVERSIDAD NACIONAL DE JAÉN MANUAL DE BIOSEGURIDAD DE BIOLOGÍA LABORATORIO DE BIOLOGÍA Prácticas de laboratorio

97 %

Equipos de seguridad

2%

Diseño de laboratorio

1%

De esta forma, resulta evidente que la primera importancia corresponde a aquel aspecto que representa el menor costo para la Institución. 14. PROCEDIMIENTO SEGURO EN EL LABORATORIO

14.1

Acceso al laboratorio.

El ingreso al Laboratorio debe estar permanentemente limitado con un letrero de acceso restringido. Además este letrero debe tener el símbolo de riesgo biológico y el nivel de bioseguridad correspondiente

Sólo puede ingresar el personal involucrado en el trabajo y que esté en conocimiento de los riesgos potenciales. El personal de otros servicios sólo podrá ingresar previa autorización de un profesional. Las puertas del Laboratorio deben mantenerse cerradas. No se autorizará ni permitirá la entrada de niños en las zonas de trabajo del Laboratorio. 14.2 

Prohibiciones en el laboratorio

Está prohibido: comer, beber, fumar, masticar chicle y maquillarse en el Laboratorio.



El personal que use lentes de contacto tiene estricta prohibición de manipularlos en el área de trabajo, de manera de evitar su contaminación.



Está prohibido almacenar alimentos, bebidas o cualquier otra clase de efectos

UNIVERSIDAD NACIONAL DE JAÉN MANUAL DE BIOSEGURIDAD DE BIOLOGÍA LABORATORIO DE BIOLOGÍA personales en los refrigeradores y muebles del Laboratorio. 

El personal no debe salir del Laboratorio con las prendas de protección personal (delantal de trabajo)



No se debe usar calzado abierto (chalas), tacos, sólo zapatos cerrados.



No se debe guardar las prendas protectoras junto con la ropa de calle.



No se debe utilizar bufandas ni corbatas para el trabajo de rutina del laboratorio, sobre todo si se usa mechero.



Está prohibido el pipeteo bucal de pipetas, para ello debe existir la disponibilidad de propipetas manuales o automáticas.



El personal debe evitar poner material contaminado y lápices en su boca.



Evitar al máximo el empleo de libros y material de escritorio en el área técnica de trabajo con el fin de evitar que éstos se contaminen con

muestras o se manchen

con reactivos. 14.3

En

cualquier

Recomendaciones en el laboratorio

etapa

del

trabajo

se

deben

tomar

las

siguientes precauciones,

independiente del tipo de microorganismos que se manipule:

Verificar que la salud e higiene del personal sea la adecuada para desarrollar su trabajo y que conozca y use las barreras de protección adecuadas para las diferentes muestras, ya que trabajará con muestras clínicas, líquidos corporales, en general sustancias infecciosas o potencialmente infecciosas, que implican distinto riesgo para su integridad física. No deberá trabajar si está enfermo.

Rotular todo material que se necesite identificar ya que se debe tener conocimiento de todo lo que se use, sobre todo de la correspondencia entre muestra clínica y paciente.

Antes y después de finalizar el trabajo, se deberá lavar las manos con jabón líquido y secar con papel, ya que las manos constituyen el mejor vehículo de microorganismos siendo un riesgo para el profesional y demás personal. Utilizar guantes desechables.

UNIVERSIDAD NACIONAL DE JAÉN MANUAL DE BIOSEGURIDAD DE BIOLOGÍA LABORATORIO DE BIOLOGÍA Siempre se deben usar las barreras protectoras: 

Delantal de uso exclusivo para el área.



Guantes de protección.



Mascarilla.



Antiparras (lentes).



Pechera plástica.

No trabajar con puertas ni ventanas abiertas ya que en el ambiente hay microorganismos, los que llevados por las corrientes de aire pueden contaminar las siembras microbiológicas o los medios de cultivos, estos últimos en su etapa de preparación.

Antes de iniciar cualquier proceso, deberá cerciorarse que todo el material necesario esté en su lugar de trabajo, evitando así el desplazamiento y circulación con la ropa de trabajo desde “zonas contaminadas” y disminuyendo el riesgo para el demás personal.

Para prevenir infecciones, diferenciar una mesa de trabajo del laboratorio para poner el material contaminado. Mantener separadas las solicitudes de examen y otros materiales que no signifiquen riesgo. 15. NORMAS DE BIOSEGURIDAD EN LABORATORIO CLÍNICO

15.1

Bioseguridad en la toma de muestra

Para la manipulación de toda muestra de sangre o otros fluidos biológicos se deben utilizar las barreras de protección: guantes y guardapolvo.

El Laboratorio proporcionará el material adecuado para la toma de muestras (tubos, envases desechables adecuados al tipo de muestra).

UNIVERSIDAD NACIONAL DE JAÉN MANUAL DE BIOSEGURIDAD DE BIOLOGÍA LABORATORIO DE BIOLOGÍA Cuando se use material cortopunzante, se deberá proteger al contacto, ya que la extracción de muestras con aguja o con material cortopunzante implica un riesgo para los que las obtienen.

Usar material desechable y eliminar en cajas adecuadas (Safe Box) después de su uso. No se debe reutilizar el material para Toma de Muestras.

Al momento de la toma de muestras se debera asegurar que el tubo o frasco quede bien tapado y colocado en un envase rígido que impida su volcamiento al ser transportado, su exposición a la luz solar directa

y a variaciones de temperatura. En el caso de las

muestras de sangre, los tubos deben ir en gradillas que impidan el derramamiento de las muestras.

El personal que participó en la extracción de muestras debe sacarse las barreras protectoras y realizar las actividades que corresponden a su higiene personal después de haber manipulado material infeccioso.

15.2

Bioseguridad en el transporte y recepción

 Las muestras clínicas deben ser transportadas por personal capacitado, en los recipientes adecuados y no se deben manipular durante el traslado.  El personal debe usar siempre barreras de protección mientras diferentes muestras. Estas barreras son: guantes, delantal adecuado.

reciba las

UNIVERSIDAD NACIONAL DE JAÉN MANUAL DE BIOSEGURIDAD DE BIOLOGÍA LABORATORIO DE BIOLOGÍA  Para evitar que las muestras clínicas líquidas se vacíen (ya sea por llenado excesivo

o

transporte

inadecuado), deben ser

acondicionadas

correctamente en un envase cerrado y luego depositadas en un cooler

de

transporte.  La recepción de muestras deberá ser hecha sólo con recipientes intactos, adecuados y rotulados.  Si a pesar de ser tomadas las medidas para evitar el derramamiento de las muestras, se mancha la orden con sangre o líquido corporal, el recepcionista deberá transcribir los datos a una nueva orden y dejar constancia del hecho en la nueva orden “copia por original sucio”.  Eliminar la orden sucia en basurero de sustancias contaminadas.  Limpiar el exterior del tubo o frasco causante del derrame con papel o algodón mojado en hipoclorito. Eliminar este papel en basurero de sustancias contaminadas.  Lavarse bien las manos.  Las muestras, luego de ser recepcionadas en el Laboratorio, deberán derivarse a la(s) sección(es) que correspondan, de acuerdo a la solicitud de examen. Ello evitará, entre otros, transporte innecesario, con el consiguiente peligro de contagio. 15.3

Normas básicas

Todo sobrante de muestras que quede en material de vidrio, plástico, goma, etc. (materiales) usados en diferentes procedimientos deberá sumergirse totalmente en recipientes adecuados (horizontales con tapa y/o verticales) con solución fresca de hipoclorito de sodio al 0.5 % o con detergente minutos

biodegradable

líquido

durante

10

como mínimo. Luego podrá ser lavado sin riesgo y esterilizados o eliminados

según sea el caso.

Todo papel, algodón, etc. usados para limpiar elementos contaminados con sangre, orina,

UNIVERSIDAD NACIONAL DE JAÉN MANUAL DE BIOSEGURIDAD DE BIOLOGÍA LABORATORIO DE BIOLOGÍA deposiciones, etc., deben ser eliminados en basurero de sustancias contaminadas

En caso de derrame de las muestras o del material en proceso, ya sea en mesones o pisos, deberá cubrirse con papel toalla, colocar encima hipoclorito

de sodio

al

1%,

esperar 30 minutos y limpiar (con guantes gruesos si es necesario). No barrer. Eliminar elementos usados en bolsa plástica que irá a la basura. 16. RECIPIENTES PARA ELIMINAR DESECHOS Y ACUMULAR MATERIAL CONTAMINADO 16.1

Material contaminado y microbiológico.

Tubos primarios y todas las muestras clínicas (sangre, suero, líquidos estériles, orina, deposición, expectoración). Residuos de la producción de material biológico como placas de cultivo, cultivos y cepas de agentes infecciosos generados en laboratorios clínicos, patológicos, industriales y de investigación). Una vez realizado todo el proceso de las muestras, se dispondrán en cajas grandes de desecho biológico, dentro de bolsa doble. Luego, estas cajas se pondrán dentro de Bolsas ROJAS, rotuladas como “Material Biológico Contaminado” o “Sustancia Peligrosa.

16.2

Material Biocontaminado.

Corresponden a restos biológicos, incluyendo tejidos, órganos, partes que hayan sido removidas de cuerpos humanos o animales. Se eliminan en bolsa de color ROJO con logo negro de contaminado. Se elimina como desecho contaminado.

UNIVERSIDAD NACIONAL DE JAÉN MANUAL DE BIOSEGURIDAD DE BIOLOGÍA LABORATORIO DE BIOLOGÍA 16.3

Para material no contaminado que va a la basura.

Se sugiere ubicar el basurero bajo la mesa de trabajo; debe contener una bolsa de polietileno NEGRA que sirva para su protección y para facilitar la posterior eliminación de los desechos desde el recipiente. Son los residuos asimilables a los domiciliarios y que no presentan un riesgo adicional para la salud humana y el ambiente y que no requieren de un manejo especial.

16.4

Para material contaminado que va a esterilizarse en:

Autoclave: Ollas, canastillos u otros. Se recomienda situarlos al costado del lavatorio o mesa de trabajo en una zona pre delimitada como “zona de material contaminado”.

16.5

Pipeteros

Y

Envases

Para

Recibir

Portaobjetos: Deben contener solución desinfectante; estar rotulados y separados de acuerdo al tipo de desecho. Deben estar provistos de tapa para evitar la eliminación de vapores tóxicos. 16.6

Para Material Cortopunzante:

Usar una caja adecuada (Safe Box) la cual deberá ser transportada al lugar de acopio de la universidad para que sean retiradas por empresa externa encargada de la eliminación.

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17. LAVADO DE MATERIAL

El personal debe usar delantal de procedimientos, pechera plástica, guantes multiuso de goma, antiparras y mascarillas.

En un laboratorio no se deberá recuperar o reutilizar el material sin asegurarse de que no constituya riesgo para el personal que lo manipulará.

En cuanto al material de vidrio, pipeteros o envases para contener objetos, deberán ser sometidos a soluciones desinfectantes (hipoclorito de sodio), estar rotulados y separados de acuerdo al tipo de uso que se les dio.

Los desechos deberán ser eliminados desde el sector de lavado al exterior sin ingresar al área de trabajo o de circulación del personal.

Los recipientes deberán retirarse diariamente, a través de una salida directa al exterior.

17.1

Hipoclorito sódico

Es un desinfectante universal activo contra todos los microorganismos.

Es

de

uso

múltiple:

lavado

de

instrumentos, limpieza de superficies, desinfección de derrames, descarte de material contaminado.

Sus ventajas son el amplio espectro, uso múltiple, bajo costo, esporicida, fácil de adquirir y virucida.

Las desventajas son su carácter corrosivo, ya que dañan los aceros que llevan níquel y cromo, el hierro y otros metales. No pueden dejarse en contacto con acero inoxidable por más de 30 minutos.

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18. NORMAS BÁSICAS DE BIOSEGURIDAD EN EQUIPOS

a) Uso de refrigerador: Debe ser de uso exclusivo para reactivos y materiales de Laboratorio. Debe mantenerse ordenado y con áreas para muestras y reactivos. No se debe guardar alimentos. Debe cumplir con un programa de limpieza y control de temperatura (Tº máxima y mínima).

b) Uso del autoclave: El manejo y mantenimiento rutinario debe ser responsabilidad de personal adiestrado. El material y objetos a esterilizar se deben agrupar sin apretarlos en la cámara de modo que el vapor pueda circular sin dificultad. Al introducir líquidos en el autoclave, la evacuación debe ser lenta, pues al sacarlos pueden llegar a hervir por sobrecalentamiento. Los trabajadores deben llevar guantes adecuados al abrir la autoclave, incluso cuando la temperatura esté por debajo de los 80ºC. Procurar

que

las

válvulas

de

descarga

del

UNIVERSIDAD NACIONAL DE JAÉN MANUAL DE BIOSEGURIDAD DE BIOLOGÍA LABORATORIO DE BIOLOGÍA autoclave no queden bloqueadas por papel u otro material presente en la carga.

c) Uso de microscopio Colocar en una mesa firme, nivelada, exenta de vibraciones. Nunca tocar los lentes con los dedos. El pedestal deberá limpiarse con un paño húmedo con solución indicada (no ácido). Las lentes deben limpiarse después de cada utilización con papel para lentes y con un producto apropiado. Comprobar cada mes la alineación del condensador.

d) Uso de equipo espectrofotómetro.

Colocar en una mesa firme, nivelada, exenta de vibraciones. Asegurarse que esté conectada a un UPS. Prender acuerdo

el a

equipo las

y

calibrar

de

especificaciones

técnicas del manual y de los insertos. Lavar con agua diluida con lejía antes de apagar el equipo. e) Uso de baño maria

Antes de encender el equipo verificar que la llave de drenaje ubicada en la parte lateral inferior, esté cerrada. Echar agua destilada en el interior del equipo hasta donde sea conveniente (teniendo en cuenta que cubra la resistencia), aproximadamente 5 Lt. Y agregar más cada vez que se consuma por su propio uso. Terminado el trabajo apagar el quipo presionando el

UNIVERSIDAD NACIONAL DE JAÉN MANUAL DE BIOSEGURIDAD DE BIOLOGÍA LABORATORIO DE BIOLOGÍA boton a la posición “OFF” Importante: Mantener o verificar el nivel de agua del equipo, cada vez que sea usado.

LIMPIEZA: Para su mantenimiento y limpieza drenar el agua a través de la llave de drenaje ubicada en la parte lateral del equipo. Limpiar el interior con una franela y agua. La parte externa con un paño ligeramente humedecido. f) Uso de estereoscopio El Estereoscopio es un aparato que se utiliza para representar una imagen de dos (02) dimensiones 2D como si la misma estuviera en tres (03) dimensiones 3D, es decir, produce un efecto imaginario o una recomposición en el cerebro en forma tridimensional de una imagen bidimensional. Los estereoscopios son dispositivos que se valen de la óptica para realizar su función.

Los microscopios y los estereoscopios son aparatos ópticos y se deben utilizar con sumo cuidado para evitar romper o dañar las lentes que son la parte principal del dispositivo.

Adicionalmente se debe tener especial cuidado en el cuido y mantenimiento de los mismos, dentro de los cuales se pueden mencionar algunos. Limpiar las lentes regularmente con paños secos o de telas muy suaves como la gamuza. Evitar los diluyentes y substancias abrasivas para su limpieza. Mantener

en perfecto estado las partes o piezas

mecánicas. Guardarlos en sitios secos, evitando su exposición prolongada a la luz directa del sol. Si cualquier líquido es derramado sobre estos dispositivos se deben secar inmediatamente con materiales de gran absorción. Si el microscopio se debe conectar a la red eléctrica, verificar que cumpla las especificaciones de la electricidad a la cual se desea servir y desconectarlo una vez finalizado su uso. Si es necesario trasladarlos a otro lugar, se debe usar el estuche acolchado para prevenir rupturas.

UNIVERSIDAD NACIONAL DE JAÉN MANUAL DE BIOSEGURIDAD DE BIOLOGÍA LABORATORIO DE BIOLOGÍA g) Uso de agitador magnético Un Agitador Magnético es un dispositivo electrónico que utiliza un campo magnético para mezclar de manera automatizada un solvente y uno o más solutos. Este dispositivo se compone de una pequeña barra magnética o barra de agitación y una placa debajo de la cual se tiene un magneto rotatorio o una serie de electromagnetos dispuestos en forma circular a fin de crear un campo magnético rotator.

El agitador magnético sirve para la elaboración de soluciones, suspensiones y dispersiones fluidas o poco viscosas y es utilizado de la siguiente manera: Antes de comenzar la agitación, comprobar que:

El cable de conexión a la red eléctrica está conectado. El interruptor general está en posición 0. El mando de velocidad se encuentra en velocidad 0. Colocar el vaso de precipitados con el contenido que se quiere agitar sobre el plato de agitación. Introducir el imán de teflón o mosca en su interior. Cubrir el vaso con papel parafinado o de aluminio.

Durante la agitación: Encender el aparato accionando el interruptor correspondiente. Ajustar la velocidad. Comenzar siempre con la más baja para ir aumentándola progresivamente, hasta alcanzar la velocidad adecuada. Controlar que el líquido no se salga del recipiente.

Finalizada la agitación: Colocar el mando de velocidad en posición 0. Apagar el interruptor. Sacar el imán de teflón o mosca de su interior.

UNIVERSIDAD NACIONAL DE JAÉN MANUAL DE BIOSEGURIDAD DE BIOLOGÍA LABORATORIO DE BIOLOGÍA h) Uso de Incinerador de bacterias Tubo incinerador de cuarzo, con resistencia eléctrica y aislado térmicamente con fibra cerámica. Rejilla exterior protectora en acero inoxidable. Base en acero pintado al horno con resina epoxi. Interruptor luminoso de puesta en marcha. La esterilización es obtenida por la acción de rayos infrarrojos. La materia orgánica es incinerada introduciéndola en un

tubo

de

cuarzo

incandescente,

evitando

salpicaduras de microorganismos infecciosos. Se consigue una completa esterilización en 5/8 segundos a 850 º i)

Uso de refractómetro de mano.

Los refractómetros son instrumentos ópticos de precisión que miden en brix, en grados Oechsle, en babo, miden el contenido de azúcar, de alcohol o de sal (según el tipo) de pruebas de fluidos. Todos los aparatos disponen de una compensación de temperatura automática a 20°C y están preparados para cantidades muy pequeñas. Su formato pequeño y ligero lo hacen propicio para realizar mediciones in situ. Mantener limpios tanto la tapa como el prisma, la suciedad puede influir negativamente sobre la precisión en la medición. Evite las rayaduras sobre el prisma, también pueden influir negativamente en la medición. En la limpieza utilice sólo un paño húmedo y evite limpiadores agresivos, seque perfectamente el aparato tras su limpieza. Limpiar el aparato simplemente con un paño húmedo y nunca bajo el agua, ya que ésta podría penetrar en el aparato. Evite golpes o caídas que podrían dañar el sistema óptico. Guarde el aparato en un lugar seco.

UNIVERSIDAD NACIONAL DE JAÉN MANUAL DE BIOSEGURIDAD DE BIOLOGÍA LABORATORIO DE BIOLOGÍA j)

Uso de Balanza Analitica

La Balanza Analitica es la que nos proporciona mayor exactitud, es por eso que es usada de preferencia en ambientes como los laboratorios clínicos y de investigación, en donde se requiere de gran precisión en la medida.

a) La balanza debe protegerse de las variaciones de temperatura y humedad, exposición a la Luz solar, no colocarse cerca de hornos, baños de María, etc., tanto al almacenarse como en su uso, ya que los objetos calientes o tibios tienen un peso menor que cuando están fríos, debido a corrientes que se establecen con el aire que los rodea. b) Debe colocarse en una mesa que sea firme y protegerla de vibraciones (de ser posible una mesa exclusiva para ella). c) Los platillos y el fiel deben descansar en sus soportes, La campana debe permanecer siempre cerrada. d) Mientras la balanza está oscilando, la sustancia a pesar no debe colocarse sobre los platillos, ni removerse. Para colocar el peso, debe de estar cerrado el fiel y los platillos colocados sobre los soportes. e) Si se derrama algún reactivo durante la pesada, hay que limpiar de inmediato con un paño limpio y seco. f)

No manipular con los dedos, hay que utilizar las pinzas que se encuentran en la caja de pesas.

g) La balanza debe protegerse de corrientes de aire, pues estas producen inestabilidad. Se requiere más o menos 15 minutos con 30 segundos para que el flujo de aire cese después de que se ha cerrado la puerta siempre que no se está utilizando la balanza.

UNIVERSIDAD NACIONAL DE JAÉN MANUAL DE BIOSEGURIDAD DE BIOLOGÍA LABORATORIO DE BIOLOGÍA k) Incubadora Las incubadoras de laboratorio se utilizan mucho para aplicaciones de biología, como por ejemplo para cultivos

celulares

microbiológicos,

y

de

tejidos,

para

estudios

y hematológicos, para estudios

bioquímicos, procesamiento de alimentos y aireación de células, también se utiliza para estudios animales, estudios de solubilidad y de fermentación como también para cultivos de bacterias.

1. Al momento de usar: 

No hacer uso de la incubadora cerca a fuentes de calor, agua o sustancias inflamables que puedan provocar choques eléctricos o explosiones.



Evitar el derrame de sustancias ácidas que puedan afectar la incubadora, en especial su en su interior. Este tipo de accidentes pueden llegar a las partes eléctricas y provocar daños irreparables o choques eléctricos.



Evitar incubar sustancias que produzcan vapores tóxicos perjudiciales para salud y medio ambiente.



Usar la indumentaria necesaria de protección como gafas, guantes, peto, etc.



Controlar la temperatura de operación de la incubadora por medio de un termómetro externo certificado.

2. Al momento de su limpieza: 

Las rutinas de limpieza siempre se deben realizar con el equipo apagado. Debe estar desconectado de la red eléctrica y su cámara interna debe encontrarse a temperatura ambiente.



Utilizar productos de limpieza no abrasivos. Únicamente se deben utilizar para áreas de fácil acceso tanto de su interior como del exterior de la incubadora.



Evitar el contacto o derrame de estos productos con las partes eléctricas.



Hacer uso de los productos aptos de limpieza y desinfección. Sobre todo en

UNIVERSIDAD NACIONAL DE JAÉN MANUAL DE BIOSEGURIDAD DE BIOLOGÍA LABORATORIO DE BIOLOGÍA casos donde haya presencia de agentes contaminantes que pongan en riesgo la salud y el medio ambiente.

l) Horno Esterilizador Es utilizado en el Laboratorio para esterilización, secado de material y para secar sales químicas, regularmente sus temperaturas oscilan de 60ºC a 300ºC.La circulación del aire asegura una intense transmisión del calor y, por lo tanto, un secado más rápido. Un orificio de salida de aire, en la pared superior (en el techo) asegura una renovación continua del aire.

a) Para asegurar un calentamiento homogéneo de todo el material colocado en la estufa o en un horno desecado, se recomienda colocarlo en los estantes de forma que no impida la circulación del aire. b) Un horno no debe utilizarse para secar o esterilizar material descartable c) Nunca trate de limpiar un horno utilizando objetos punzantes, ya que puede dañar la cámara interna. d) Cuando un horno ha iniciado el proceso de secado de material, nunca introduzca material mojado porque el que se encuentra ya seco, se quiebra por el cambio brusco de temperatura. e) El mantenimiento y reparación de de un horno deben ser solicitados al Departamento de Mantenimiento del Laboratorio.

m) Uso de extintores. 

Sáquelo de su soporte



Diríjase al lugar del incendio CAMINANDO



Ubíquese a favor del viento si es en el exterior o bien a favor de las corrientes de aire si es en el interior de una oficina o habitación.



Quite el anillo de seguridad y ubíquese a una distancia de 1,50 metros.



Con una mano tome la válvula de descarga y con la otra, la manguera.



Presione la manilla de presión apuntando a la base del fuego.



Apriete la válvula de descarga dirigiendo el chorro del agente extintor a la base de la

UNIVERSIDAD NACIONAL DE JAÉN MANUAL DE BIOSEGURIDAD DE BIOLOGÍA LABORATORIO DE BIOLOGÍA llama si es fuego clase " A ", haga un barrido comenzando desde un extremo a otro si es fuego clase " B”. 

Utilice la carga necesaria para apagar las llamas.



Una vez apagado el fuego, retírese del lugar RETROCEDIENDO, ya que el fuego puede reaparecer. Avise a quién corresponda para enviar de inmediato a RECARGA el equipo utilizado.

Seguridad 

No colocar el extintor en el suelo.



Debe colocarse a una altura mínima de 1,30 metros sobre el piso.



Debe colocarse en un rectángulo rojo y a la vista de todos.

Recuerde: La mejor forma de operar un extintor es evitando que el fuego comience, cumpliendo las normas de Prevención de Incendios.

19. NORMAS BÁSICAS DE BIOSEGURIDAD POR SECCIONES DEL LABORATORIO DE BIOLOGIA 19.1 

ORINA

Barreras Protectoras: Delantal de procedimientos, guantes de látex, mascarilla desechable.



Proceder según técnica.



Coloque muestra de orina en el porta objeto con pipeta Pasteur y después de leída, elimine todo el material según norma general.



Si

utiliza

métodos

automáticos

o

semiautomáticos,

este

material contaminado

(discos, puntas), debe ser descontaminado según norma. 

La lectura de los sedimentos urinarios deberá realizarse con guantes.

19.2

SANGRE



Barreras Protectoras: Delantal de procedimientos, guantes de látex.



Efectúe técnica según determinación solicitada



Agite tubo con la reacción tapando con parafilm, nunca con el dedo.



El envase de desechos líquidos que tiene cada equipo se deben vaciar una vez al día en bidones especiales para desechos. Los bidones son retirados diariamente del Laboratorio

UNIVERSIDAD NACIONAL DE JAÉN MANUAL DE BIOSEGURIDAD DE BIOLOGÍA LABORATORIO DE BIOLOGÍA Clínico y guardados en bodega de acopio los cuales son retirados semanalmente por una empresa externa. 19.3 

Barreras

PARASITOLOGÍA Protectoras: Delantal,

guantes

de

látex,

pechera

plástica, mascarilla

desechable y antiparras. 

En esta sección se debe trabajar desde la recepción hasta la lectura de las muestras con guantes.



Se debe trabajar en área delimitada.



Todo el material reutilizable (rejillas, frascos de vidrio, tapa, tubos, centrifuga, etc.), deberá mantenerse en solución de hipoclorito de sodio 0.5 %, durante al menos 1 hora, luego se lava y esteriliza.



El material desechable y resto de muestras se eliminan en

basurero de material

contaminado. 

Las láminas y laminillas se colocan en solución de hipoclorito de sodio 0.5 %, y luego de 4 horas como mínimo, se lavan.



Las láminas de los test de Graham luego de estar en solución de hipoclorito de sodio 0.5 %, por 1 hora antes de lavar.



La lectura de los test de Graham se debe realizar con mascarilla y guantes.



Cualquier otra técnica deberá cumplir con las medidas básicas de bioseguridad.

19.4 

MICROBIOLOGÍA

Llevar puesta la bata de laboratorio en todo momento. La misma debe permanecer completamente cerrada.



Limpiar y desinfectar las superficies de trabajo, antes de comenzar y al finalizar la sesión práctica.



Lavar las manos con agua y jabón antes de realizar las actividades programadas, antes de salir del laboratorio y siempre después de manejar materiales que se sabe o se sospecha que son contaminantes.



Recoger el cabello largo.



Conocer el manejo de todos los equipos y reactivos a emplear antes de iniciar las actividades indicadas en la práctica. Si usted tiene alguna duda, diríjase al profesor.



Tener cuidado con el alcohol cuando manipule el mechero.



Regresar los reactivos y equipos empleados (microscopio, mechero, etc.), limpios

UNIVERSIDAD NACIONAL DE JAÉN MANUAL DE BIOSEGURIDAD DE BIOLOGÍA LABORATORIO DE BIOLOGÍA y de manera ordenada a su respectivo lugar una vez finalizada la actividad. 

Colocar los materiales de vidrio contaminados en los recipientes dispuestos para tal fin, por ejemplo: las pipetas en los pipeteros, tubos y placas de Petri en las ollas de desecho, etc.



No usar ningún reactivo que no esté debidamente identificado, verificar las etiquetas de los mismos y estar seguro de cómo emplearlo.



No devolver sustancias a sus envases originales.



Emplear la propipeta al medir líquidos. Está rigurosamente prohibido pipetear con la boca. De igual manera las pipetas tendrán tapones de algodón para reducir la Contaminación de estos dispositivos de pipeteo.



Reportar inmediatamente cualquier accidente al profesor (derrame de material contaminado, heridas, quemaduras, etc.), ninguno puede ser catalogado como menor.



Reducir al mínimo la formación de aerosoles durante la realización de cualquier trabajo práctico.

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20. Referencias Bibliográficas Linkografia:

1. Alados JC, Gómez E, Leiva J, Rojo E. Seguridad en el laboratorio de Microbiología Clínica (Pérez JL, ed). Madrid: SEIMC. 2013. 2. Gadea E, Guardino X, Rosell MG. NTP 500: Prevención del riesgo en el laboratorio: elementos de actuación y protección en casos de emergencia. Madrid: Instituto Nacional de Seguridad e Higiene en el Trabajo. 1998.

Normas de Bioseguridad. Octubre 2001. Unidad de Salud Ocupacional. Vicerrectoría de Bienestar Universitario. Universidad del Valle. URL: http://www.univalle.edu.co/~saludocu/normas.htm

Ortega, Y.; Quevedo F. 1991. Garantía de la Calidad de los Laboratorios de Microbiología Alimentaria. Organización Panamericana de la Salud.

Organización Mundial de la Salud. Organización Mundial de la Salud. Manual de Bioseguridad en el Laboratorio. Ginebra: OMS; 2005

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Manual de Laboratorio de Biologia - UNJ

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